为什么癌症研究要用a549细胞癌症细胞a549细胞特点 生物通
A549细胞是腺癌人肺泡基底上皮细胞。在自然界中，这些细胞是有鳞的，它们可以通过肺泡扩散来传播水、电解质等一些物质。A549细胞如果体外培养，会生长成单层细胞，单层细胞会附着或紧贴培养瓶。人肺泡上皮细胞系A549可以在体外溶液中固定或悬浮。这些细胞的另一个特点是可以合成卵磷脂，它们含有高度不饱和脂肪酸，对维持细胞膜磷脂具有重要意义。A549细胞广泛用于型肺上皮细胞模型的体外药物代谢模型，也可作为转染宿主。
A549细胞的复苏方法？
1.首先迅速从液氮槽中取出需要复活的细胞，迅速放入37摄氏度的水浴中，不断摇动。注意瓶口不要接触水面，防止细胞被污染；2.将37水浴中的细胞连同烧杯一起带入细胞室，待细胞融化均匀后取出；3.将细胞悬液倒入离心管中，加入3-4滴完全培养基，置于离心机中，离心1500转(调整二档)3-4分钟。观察细胞沉淀，如果太少，再次离心3-4分钟；4.取出离心管，倒出上清液，向离心管中加入2滴培养液，用肘形滴管伸至液面以下连续吹气(注意不要将肘伸出液面，以防产生气泡，影响细胞生长)；5.在新的细胞培养瓶中加入两滴培养液，然后将离心管中的细胞转移到新的细胞培养瓶中(防止加入时产生气泡)并使细胞均匀游走；6.用酒精擦拭瓶子，用显微镜观察细胞形态(透明的圆形细胞漂浮在其中)，在培养瓶上写下日期和培养细胞的名称；7.稍微松开培养瓶的盖子，第二天放入CO2培养(便于CO2进入)观察(细胞一般贴壁4小时)；
为什么使用a549细胞做毒性实验
为什么要用a549细胞做毒性实验？1.培养A549细胞，了解A549细胞的增殖周期，扩增A549细胞；2.收集A549细胞并计数，按一定密度铺板，如2500细胞/孔、25uL/孔(参考值，需优化)；3.在细胞板中培养一定时间，如24小时等。需要根据具体实验和板材的密度来确定，需要优化。至少等到细胞贴壁后再进行下一步；4.制备ABCD化合物溶液，通常将化合物溶解在DMSO中。因为细胞对DMSO比较敏感，所以在正式实验之前，需要测试实验系统的DMSO耐受性，以获得A549在本实验系统中的最大DMSO耐受性。假设A549能耐受1% DMSO，则需要配制100终浓度的ABCD化合物溶液，用培养基稀释至终浓度。5.弃去细胞培养板中的培养液，将配制好的复合液转移到细胞培养板中，进行加药处理；6.培养一段时间，如24小时、48小时等。(这个时间需要优化)，取出细胞培养板，加入PromegaCaspase3/7Glo检测试剂，摇匀10分钟后用酶标仪读板。7.将所得数值与阴性对照和阳性对照进行比较，并将其转换为作用百分比，从而判断该化合物是否有效。如果将化合物制备成梯度溶液，也可以获得活性化合物的IC50。
